可能的原因：1）Buffer W2中未加入無水乙醇，應按比例補加無水乙醇。如果是錯誤地加入了其他試劑，請向我公司技術部尋求幫助。2）Buffer W2中錯誤地加入了70%乙醇。請向我公司技術部尋求幫助。3）細菌培養(yǎng)物中污染有真菌或其他雜菌（！注意：只針對原核生物起作用的抗生素對真菌無效）。確保從新鮮制備的含抗生素的平板中挑取單克隆菌落接種培養(yǎng)。4）質...... 查看回答 ​

1）細菌沉積在管底，難以用旋渦振蕩充分懸浮。如果要收集超過5ml細菌培養(yǎng)物，卻仍然使用快速收集菌體（12000 rpm 離心30秒）的方法，可能會導致收集的菌體難以懸浮，此時可嘗試用移液器吸頭吹打菌體沉淀的方法懸浮細菌；或者改為3000 rpm離心5分鐘收集菌體。2）加入Buffer II后，溶液變得非常粘稠，無法流動。通常造成上述原因是細菌用量過多所至，請適當減少細菌用量...... 查看回答 ​

1）限制性酶切后電泳質粒消失，沒有條帶，或者電泳條帶出現(xiàn)嚴重的拖尾現(xiàn)象?？赡苁沁x用了野生型的或者是end A⁺的宿主菌所致，并且未用Buffer W1洗滌純化柱。請確保用Buffer W1洗滌純化柱，或者按附錄中的方法對質粒DNA作進一步的純化。 2）酶切不能完全切開。本試劑盒純化得到的質粒DNA不存在酶切抑制物，可直接用于酶切（比如20 μl酶切體系...... 查看回答 ​

1)正常的質粒DNA帶型，見圖1:C泳道：空載體pUC19電泳效果。頂部條帶1：二聚體質粒DNA；中間條帶2：含切口的質粒DNA；下部條帶3：超螺旋質粒DNA。A泳道：空載體pUC19單酶切效果。B泳道：含插入片段的pUC19雙酶切效果。2)異常的質粒DNA帶型，見圖2：獲得的質粒DNA二聚體含量很高，或者純化的質粒DNA于﹣20℃儲存一段時間后二聚體增多（見圖2泳道1）。...... 查看回答 ​

可能的原因：1)Buffer I中所含的RNase A活性降低。如果加入RNase A的Buffer I在2~8℃保存的時間超過6個月的，應再補充RNase A至終濃度100 μg/ml。2)菌液量過多或者細菌本身特性導致RNA含量過多，不能完全被RNase A降解?？梢栽黾覤uffer I中RNase A的濃度。3)冬季環(huán)境溫度低，會導致RNase A活性降低...... 查看回答 ​

可能的原因：1）溶解步驟操作太劇烈：加入Buffer II后應溫和地翻轉離心管使細菌溶解。2）溶解步驟停留時間過長：加入Buffer II后靜置時間不應超過5分鐘。3）中和步驟操作太劇烈：加入Buffer N8(III)后應溫和地翻轉離心管使溶液中和。4）細菌的培養(yǎng)時間超過16小時，導致部分細菌出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象。5）細菌不是新鮮收集的或者收...... 查看回答 ​