近來有用戶反映Simgen的2×SYBR Green PCR Mix（7106100）產(chǎn)品做PCR檢測，與某公司的SYBR Green Mix相比較，發(fā)現(xiàn)有CT值有增大的現(xiàn)象，這是為什么呢？

小編經(jīng)過深入研究，發(fā)現(xiàn)當選用 2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ配合用戶的引物PCR檢測時，CT值就與某公司的SYBR Green Mix幾乎一致了。原來2×SYBR Green PCR Mix（7106100）是追求高特異性的產(chǎn)品；而2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ則是追求高靈敏度的產(chǎn)品--但是它對于引物的要求會比較高，如果引物設計得不好，在PCR的過程中，模板起始濃度較低時很容易出現(xiàn)非特異擴增，下面就讓小編給大家介紹一下這兩款產(chǎn)品的優(yōu)點及不足：

下面是兩款產(chǎn)品實例測試： 

PCR體系配置

2×SYBR Green PCR Mix的標準曲線 
 
 從上圖所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的相關系數(shù)高達0.999，而且重復性高。

2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ（7107100）的標準曲線

從上圖所述，2×SYBR Green PCR MixⅡ在高濃度模板時，相關系數(shù)高達0.999，重復性高；但是引物設計不完美時，一旦有低模板濃度，就會出現(xiàn)非特異擴增，從而降低相關系數(shù)。

CT值表

從CT值表格及融解曲線看，可看出2×SYBR Green PCR MixⅡ在靈敏度上比2×SYBR Green PCR Mix（7106100）會高出0.5-1個CT值左右，但是在低濃度模板時（10^-7），2×SYBR Green PCR MixⅡ的CT值出現(xiàn)異常，這是因為在引物設計的不是很好時，2×SYBR Green PCR MixⅡ在低濃度模板時易出現(xiàn)非特異擴增。  

綜上所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的特異性比2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ高，但是在靈敏度上不如2×SYBR Green PCR MixⅡ。所以倘若追求高特異性，小編推薦使用2×SYBR Green PCR Mix（7106100），如果追求靈敏度，還是推薦使用2×SYBR Green PCR MixⅡ。

新景生物實驗室