1.取50~100mg組織（新鮮或-70℃及液氮中保存的組織均可）置1.5ml EP管中，加入1ml Trizol充分勻漿，室溫靜置5min。

2.可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。

3.加入0.2ml氯仿，劇烈振蕩15~30s，靜置2~3min。

4.4℃離心，12000g×15min。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。

5.小心吸取上清至一新的DEPC處理過的1.5ml EP管中（如要分離DNA和蛋白質可保留有機相），加入0.5ml異丙醇，將管中液體輕輕混勻，室溫靜置10min。

6.4℃離心，12000g×10min。離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。

7.棄上清，于沉淀中加入75%乙醇（冰冷）1ml，振搖，充分洗滌沉淀。

8.4℃離心，12000g×5min。

9.棄上清，短暫離心，小心吸取棄去上清。

10.加入適量（20μl）DEPC （Rnase Free）H₂0溶解RNA（65℃促溶10~15min）。

11.取2μl進行電泳，其余-80℃保存。