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病毒核酸純化試劑盒相關實驗案例

作者:新景實驗室
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一、實驗目的:

比較simgen病毒核酸純化試劑盒和傳統(tǒng)煮沸法提取核酸的效果

二、實驗方法:

1.采用Simgen病毒核酸純化試劑盒提取HBV DNA(詳見產品說明書);

2.采用傳統(tǒng)煮沸法提取HBV DNA

3.將所獲核酸進行擴增

三、實驗樣本:

血清

四、實驗結果:

將所得的DNA作為模板擴增,得:

                                                                                           

曲線1:傳統(tǒng)煮沸法提取的血清中HBV DNA作為模板的擴增曲線(50 μl擴增體系中加入5 μl分離的DNA)。
曲線2Simgen病毒核酸純化試劑盒分離純化的同一血清(200 μl)中HBV DNA作為模板的擴增曲線(50 μl擴增體系中加入5 μl純化的DNA)。
曲線3:提高Simgen病毒核酸純化試劑盒分離純化的HBV DNA作為模板的使用量的擴增曲線50 μl擴增體系中加入25 μl純化的DNA)。

五、實驗結論:

1.根據(jù)曲線1和曲線2分析,Simgen病毒核酸純化試劑盒所提取的HBV DNA的濃度較傳統(tǒng)煮沸法更高,因此檢測靈敏度也更高。

2.根據(jù)曲線2和曲線3分析,增加HBV DNA模板使用量,CT值減小,未見明顯的抑制效果,說明采用Simgen病毒核酸純化試劑盒提取的HBV DNA純度較高,不含雜質和抑制物。